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熒光pcr試劑盒的這些功能特性你都了解嗎?

瀏覽次數(shù):762發(fā)布日期:2021-02-03
   PCR即聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),是指在DNA聚合酶催化下,以母鏈DNA為模板,以特定引物為延伸起點,通過變性、退火、延伸等步驟,體外復(fù)制出與母鏈模板DNA互補(bǔ)的子鏈DNA的過程。
  熒光pcr試劑盒是一項DNA體外合成放大技術(shù),能快速特異地在體外擴(kuò)增一定長度的DNA段??捎糜诨蚍蛛x克隆,序列分析,基因表達(dá)調(diào)控,基因多態(tài)性研究等許多方面,且價格合適。
  CP4-EPSPS是從土壤農(nóng)桿菌 CP4 菌株中分離得到的抗除草劑草甘膦基因,是轉(zhuǎn)基因研究中為常用的一種篩選標(biāo)記基因,因此本公司根據(jù)探針法 qPCR原理開發(fā)了專門用于檢測 CP4-EPSPS 的試劑盒,熒光pcr試劑盒具有下列特點:
  1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板。
  2. 根據(jù) CP4-EPSPS 保守區(qū)域設(shè)計引物和探針,能專一性地檢測出樣品中的CP4-EPSPS 成分,但不能檢測其他非 CP4-EPSPS 成分。
  3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
  4. 一管式閉管操作,降低了交叉污染。
  5. 快速,整個檢測過程(按一個樣品計)所需時間僅為 2.0 小時。
  6. 本只能用于科研,足夠50次20uL體系的探針法熒光定量PCR。
  在高溫(94℃)下,待擴(kuò)增的靶DNA雙鏈?zhǔn)軣嶙冃猿蔀閮蓷l單鏈DNA模板;而后在低溫(37~55℃)情況下,兩條人工合成的寡核苷酸引物與互補(bǔ)的單鏈DNA模板結(jié)合,形成部分雙鏈;在普通Taq酶的適宜溫度(72℃)下,以引物3’端為合成的起點,以d NTP為原料,沿模板以5’→3’方向延伸,合成DNA新鏈。這樣,每一雙鏈的DNA模板,經(jīng)過一次解鏈、退火、延伸三個步驟的熱循環(huán)后就成了兩條雙鏈DNA分子。
  熒光pcr試劑盒這樣進(jìn)行,每一次循環(huán)所產(chǎn)生的DNA均能成為下一次循環(huán)的模板,每一次循環(huán)都使兩條人工合成的引物間的DNA特異區(qū)拷貝數(shù)擴(kuò)增一倍,PCR產(chǎn)物得以2n的形式迅速擴(kuò)增,經(jīng)過25~30個循環(huán)后,理論上可使基因擴(kuò)增10 倍以上。
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