欧美性大战久久久久xxx,久久久久久久爽少妇毛片,久久成人国产精品免费软件,日日躁夜夜躁狠狠久久av

您好,歡迎進(jìn)入上海莼試生物技術(shù)有限公司網(wǎng)站!
全國(guó)服務(wù)熱線:13585831301
上海莼試生物技術(shù)有限公司
您現(xiàn)在的位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 淺析熒光素酶檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟

淺析熒光素酶檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟

瀏覽次數(shù):1038發(fā)布日期:2022-06-23
  熒光素酶檢測(cè)試劑盒是生物體內(nèi)催化熒光素或者脂肪醛氧化發(fā)光的一類酶的總稱,可以從細(xì)菌、螢火蟲、海星等生物中提取出來。熒光素酶的這種催化底物產(chǎn)生自發(fā)熒光的特性可以靈敏地檢測(cè)基因的表達(dá)。
 
  可分別催化各自的底物發(fā)出不同顏色的熒光,且兩種光吸收波長(zhǎng)不同,檢測(cè)互不干擾,因此可在同一個(gè)化學(xué)反應(yīng)體系中同時(shí)使用,作為雙熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)使用,已成為研究轉(zhuǎn)錄因子參與基因調(diào)控的有效手段,通過對(duì)啟動(dòng)子DNA片段的分析,驗(yàn)證啟動(dòng)子結(jié)合元件的反式激活能力,探討轉(zhuǎn)錄因子在信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中的分子機(jī)制。
 
  熒光素酶檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟:
 ?。?)用生物信息學(xué)方法分析并預(yù)測(cè)啟動(dòng)子區(qū)可能的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)(若目標(biāo)是檢測(cè)miRNA及其靶基因的靶向作用,則需要預(yù)測(cè)兩者結(jié)合位點(diǎn))。
 ?。?)設(shè)計(jì)引物用PCR法從基因組DNA中克隆所需的靶啟動(dòng)子片段,將此片段插入到熒光素酶報(bào)告基因質(zhì)粒(如pGL3-basic)中。
 ?。?)篩選陽(yáng)性克隆,測(cè)序。擴(kuò)增克隆并提純質(zhì)粒備用。
 ?。?)擴(kuò)增轉(zhuǎn)錄因子質(zhì)粒,提純備用。同時(shí)準(zhǔn)備相應(yīng)的空載質(zhì)粒對(duì)照,提純備用。
  (5)培養(yǎng)293(或其它目的細(xì)胞),并接種于24孔板中,生長(zhǎng)10-24小時(shí)。
 ?。?)將報(bào)告基因質(zhì)粒與轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染細(xì)胞。
 ?。?)質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染48h后,棄去培養(yǎng)基,用100μl1XPBS洗1遍。
 ?。?)傾斜96孔板,吸干剩余的PBS。
 ?。?)去離子水將5XPLB稀釋成1XPLB,使用前放到常溫。
 ?。?0)每孔加50μl稀釋好的1XPLB,搖床常溫條件下?lián)u15min,進(jìn)行裂解。
 ?。?1)白色不透光的96孔酶標(biāo)板中每孔加步驟(10)的上清液10μl,加入100μl預(yù)先混好的LARII,2s后測(cè)數(shù)據(jù)。
 ?。?2)每孔添加100μl預(yù)先混好的Stop&GloReagent,靜止2s后,測(cè)數(shù)據(jù)。
Contact Us
  • 聯(lián)系QQ:3004972506
  • 聯(lián)系郵箱:sdfskdfhs3004972506@qq.com
  • 傳真:86-021-60443211
  • 聯(lián)系地址:上海嘉定區(qū)嘉羅公路1661

掃一掃  微信咨詢

©2025 上海莼試生物技術(shù)有限公司 版權(quán)所有  備案號(hào):滬ICP備17029297號(hào)-3  技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    GoogleSitemap    總訪問量:116702 管理登陸

日本精品videosse×少妇 | 99草草国产熟女视频在线| 欧美xxxx精品另类| 久久AV无码乱码A片无码波多| 久久国产热精品波多野结衣AV| 中文字幕人妻av一区二区| 人妻少妇偷人精品视频| 国产欧美日韩| 久久精品99国产精品蜜桃小说| 日韩av无码一区二区三区不卡| 午夜欧美日韩精品久久久久久| 中文字幕AⅤ人妻一区二区| 国产乱老熟视频乱老熟女| 97超碰国产精品无码分类| 国产AV一区二区三区传媒| 亚洲熟妇无码一区二区三区| 国产人成视频在线观看| 欧美又色又爽又黄的A片18禁| 国产成人精品日本亚洲专区61| 国产精品成人国产乱| 欧美日韩中文国产一区发布| 亚洲国产精品一区二区美利坚| 精品无码人妻一区二区三区不卡| 国产精品久久久久精品综合紧 | 国产高清在线精品一区| 亚洲 中文字幕 日韩 无码| 国产av一区二区三区最新精品| 丰满人妻妇伦又伦精品app| 亚洲国产精品久久久久秋霞影院| 国产H视频在线观看| 欧美又粗又大又硬又长又爽视频| 人妻用嘴含精大口吞精| sm调教论坛一区| 亚洲av色情成人永久网站小说| 久久日本片精品AAAAA国产| 母亲韩剧国语版免费观看中文| 欧美性猛交XXXX乱大交3| 国产精品婷婷久久爽一下| 野花香高清视频在线观看免费 | 久久亚洲欧美国产精品| 女人夜夜春精品a片|