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PCR試劑盒的注意事項(xiàng),使用方法及用途

瀏覽次數(shù):1183發(fā)布日期:2021-03-02
   PCR試劑盒使用注意事項(xiàng):
  注意事項(xiàng)一:保存;未拆封的試劑盒,請于-20℃保存;拆封之后,應(yīng)在4℃保存,在試劑消耗量較少的實(shí)驗(yàn)室,可以考慮將試劑盒的按照組分單獨(dú)分裝,后保存在-20℃。
  注意事項(xiàng)二:配置;試劑盒內(nèi)所含各組份都是混合物,在靜置情況下會發(fā)生分層現(xiàn)象,因此,試劑盒現(xiàn)配現(xiàn)用,震蕩混勻,避免反復(fù)凍融,避免預(yù)混。其中,反復(fù)凍融將大幅縮短試劑盒使用壽命。在擴(kuò)增體系的選擇時(shí),盡量選擇標(biāo)準(zhǔn)體系,再根據(jù)檢材情況加入模板,之后切勿忘記以PCR用水補(bǔ)足擴(kuò)增體系。
  注意事項(xiàng)三:切勿預(yù)混;因PCR試劑盒中酶的活性較高,將各組份按照比例混合之后,即使沒有達(dá)到它的適合溫度,但也可能發(fā)生與引物結(jié)合,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)丟位點(diǎn)或者雜合子純化等情況。
  PCR試劑盒的方法和用途:
  1.支原體常規(guī)PCR檢測試劑盒(一步法)
  1)適合科研單位檢測,或單位內(nèi)檢,用PCR法檢測細(xì)胞或其他生物基質(zhì)。
  2) 比藥典操作標(biāo)準(zhǔn)合并了一步,(將內(nèi)控對照試劑預(yù)先混合在PCR mix試劑中),操作更簡潔。
  3)樣本量為2μl,靈敏度為20個(gè)基因組拷貝/反應(yīng)。結(jié)果準(zhǔn)確。
  2.支原體常規(guī)PCR檢測試劑盒(經(jīng)典法,不含Taq酶)
  1) 符合歐洲藥典、中國藥典要求,更適合細(xì)胞治療,CAR-T,抗體藥、疫苗等臨床項(xiàng)目申報(bào)和質(zhì)檢。
  2)樣本需先做DNA抽提。抽提后樣本加入量為10μl。
  3)試劑盒中不含Taq酶,需另外購買。
  4) 廠家可協(xié)助完善方法驗(yàn)證步驟。
 
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